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用λZAP Express作载体构建灵芝原基表达型cDNA文库

Construction of cDNA expression library of Ganoderma lucidum primordium using λ ZAP Express vector

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【作者】 赵明文李娜梁婉琪王南张大兵潘迎捷

【Author】 ZHAO Ming-wen 1,3,LI Na1,LIANG Wan-qi2,WANG Nan 3*,ZHANG Da-bing2,PAN Ying-jie3 (1.Key Laboratory of Microbiological Engineering of Agricultural Environment,Ministry of Agriculture, Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China;2.Agro-Biotech Research Center, 3.Edible Fungi Institute,Key Laboratory of Agriculture Genetics and Breeding of Shanghai, Shanghai Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 201106,China)

【机构】 南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室上海市农业科学院生物技术中心上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业科学院食用菌研究所 江苏南京210095上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传育种重点实验室上海201106江苏南京210095上海市农业遗传育种重点实验室上海201106

【摘要】 根据对韩国灵芝菌丝体、不同发育阶段子实体及孢子粉中灵芝酸含量的测定结果 ,以含量较高的灵芝原基为材料 ,提取mRNA ,从而构建以λZAPExpress为载体的表达型cDNA文库。经检测 ,所构建文库的滴度达到 6× 10 5pfu·mL-1,重组率达到 96 % ,插入片段的大小均在 70 0bp以上。该表达文库的构建 ,为进一步克隆和鉴定灵芝酸合成的相关基因打下了良好的基础。

【Abstract】 Firstly,ganoderic acid contents of Ganoderma lucidum HG at different developmental stages were detected.Thus,primordium with relatively high level of ganoderic acid contents was chosen as material to isolate mRNA for constructing cDNA expression library using λ ZAP Express vector.Further results showed that the tilter of the cDNA expression library was 6×105 pfu·mL -1,while the recombinant rate reached to 96%,and the length of inserts was all above 700 bp.Therefore,the constructed cDNA expression library is helpful in the further study on the cloning and characterization of the ganoderic acid synthesis related gene in G.lucidum.

【关键词】 灵芝酸原基cDNA表达文库
【Key words】 ganoderic acidprimordiumcDNA expression library
【基金】 国家自然科学基金 (3 0 3 0 0 0 0 6);南京农业大学青年基金 (KJ0 3 0 0 4);上海市科委重点专项经费
  • 【文献出处】 南京农业大学学报 ,Journal of Nanjing Agricultural University , 编辑部邮箱 ,2004年04期
  • 【分类号】Q785
  • 【被引频次】8
  • 【下载频次】333
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