鲁西黄牛皮肤成纤维细胞分离与培养的研究

【摘要】 研究了鲁西黄牛耳皮肤成纤维细胞的分离与培养、纯化方法及生长特征 ,获得了传代培养的鲁西黄牛皮肤成纤维细胞和上皮细胞。鲁西黄牛耳皮肤细胞在体外培养时呈贴壁生长 ,其原代或早期传代培养物由上皮样细胞与成纤维细胞混合组成。传代培养混合生长的细胞用 0 .2 5 %胰蛋白酶液 37℃下消化处理 3～ 4 min,脱壁悬浮的主要为成纤维细胞。采用反复消化法在传代过程中将二者逐步分离纯化 ,获得了可正常传代的鲁西黄牛耳上皮细胞系和成纤维细胞系。通过绘制生长曲线研究了鲁西黄牛耳皮肤成纤维细胞的增殖规律。传代培养至 12代的鲁西黄牛皮肤成纤维细胞染色体倍性正常。利用第 6代成纤维细胞作核供体克隆试验结果证明重构胚体外发育正常 ,囊胚发育率为 2 7.3%。更多还原