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固相时间分辨荧光免疫标记技术研究

Study of Solid-Phase Time-Resolved Fluorescence Label Immunoassay

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【作者】 潘利华周誓红孙文伟谢文兵赵超

【Author】 PAN Li-hua 1, ZHOU Shi-hong 1, SUN Wen-wei 2, XIE Wen-bing 1, ZHAO Chao 1 1. National Analytical Research Center of Electrochemistry and Spectroscopy, Key Laboratory of Rare Earth Chemistry and Physics, Changchun Institute of Applied Chemistry, Chinese Academy of Sciences, Changchun 130022, China 2. China-Japan Union Hospital of Jilin University, Changchun 130031, China

【机构】 中国科学院长春应用化学研究所国家电化学光谱分析研究中心中国科学院稀土化学和物理开放实验室吉林大学中日联谊医院中国科学院稀土化学和物理开放实验室 吉林长春130022吉林长春130022吉林长春130031吉林长春130022

【摘要】 通过固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂 4 ,7 二氯磺基苯 1,10菲罗啉 2 ,9 二羧酸标记抗 乙型肝炎表面抗体 (HBsAb)IgG实验 ,对于BCPDA标记蛋白质的方法进行了研究。结果表明 :BCPDA在相对温和条件下能与蛋白质反应 ,反应后蛋白质的相对生物活性高于 78% ,标记比为 2 3~ 5 5 ,蛋白回收率达6 0 %以上。在一定条件下与铕离子形成稳定的BCPDA Eu3 + (HBsAb)IgG标记物。利用自建的分析方法 ,测定了标记过程的有关参数。并对标记物的某些光学特性进行了研究。

【Abstract】 This paper describes optimal conditions for HBsAbIgG labeling with a new fluorescence probe, 4,7-bis-chorosulfophenyl-1,10-phenanthroline-2,9-dicarboxylic acid(BCPDA)for the solid phase time-resolved fluorimmunoassay (TRFIA). The result of experiment under states clearly that BCPDA may react with protein under relative mild condition. The relative bioactivity of reacted protein was more than 80%. The labeling molar ratio of BCPDA for HBsAbIgG was 45-70. The recovery was higher than 80%. Protein-BCPDA-Eu 3+ complex is stable. It can emit very high fluorescence intensity with very long fluorescence life times. The fluorescence of Protein-BCPDA-Eu 3+ complex has a very large stokes shift (270 nm). The emission band at 611.2 nm is very narrow. The research provides the base for developing non-isotopic immunoassay technique and clinical medical diagnosis.

【基金】 国家自然科学基金 (30 0 70 71 4 )资助项目
  • 【文献出处】 光谱学与光谱分析 ,Spectroscopy and Spectral Analysis , 编辑部邮箱 ,2004年12期
  • 【分类号】R392.3
  • 【被引频次】22
  • 【下载频次】388
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