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柑橘组织RNA提取方法研究

A Study on Methods for RNA Extraction From Citrus Tissues

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【作者】 徐昌杰陈昆松张波王钱洁叶薇佳

【Author】 Xu Changjie,Chen Kunsong,Zhang Bo ,Wang Qianjie,and Ye Weijia (Department of Horticulture,Huajiachi Campus,Zhejiang University/The State Agricultural Ministry’s Laboratory of Horticultural Plant Growth,Develop ment &Biotechnology,Hangzhou,Zhejiang310029China)

【机构】 浙江大学华家池校区园艺系/农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室浙江大学华家池校区园艺系/农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室 浙江杭州310029浙江杭州310029浙江杭州310029

【摘要】 从操作耗时、所得RNA产量和质量等方面比较了5种RNA提取方法提取甜橙叶片、幼果、成熟果实果皮和汁囊组织RNA的效果。结果表明,改良Bugos法能从上述4种组织中获得较高产量和质量的RNA。用该方法提取的温州蜜柑成熟果实果皮RNA经RT-PCR扩增成功得到了蔗糖磷酸合成酶cDNA片段。该方法还可适用于猕猴桃、梨、甜瓜、龙眼、苹果和桃果肉RNA的提取。

【Abstract】 methods f or RNA extraction from4different kinds of Citrus sinensis tissues,including f ruitlet,leaf,peel and juice sacs of ripe fruit,were evaluated upon time consu mption,yield and quality of RNA isolated.A modified Bugos method was found to be the best one among the5methods evaluated.Only with the modified Bugos metho d,higher amount and quality of RNA could be successfully extracted from all4k inds of tissues tested.The RNA obtained from peel of ripe Citrus unshiu fruit w ith the modified Bugos method was successfully used to amplify a cDNA fragment of sucrose phosphate synthase by RT-PCR.The method was found to be also suitab le for extracting RNA from pulp of ripe kiwifruit,pear,melon,longan,apple an d peach.

【关键词】 柑橘果实RNA提取电泳RT-PCR
【Key words】 Citrus fruitRNAExtractionElectrophoresisRT-PCR
【基金】 国家重点基础研究发展规划项目(973项目)(G2000046806);国家自然科学基金(批准号:30100125,30270917;30370989);浙江省自然科学基金(批准号:ZD0004;301291)
  • 【文献出处】 果树学报 ,Journal of Fruit Science , 编辑部邮箱 ,2004年02期
  • 【分类号】S666
  • 【被引频次】115
  • 【下载频次】1018
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