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天青Ⅰ分光光度法测定DNA

Spectrophotometric Determination of Deoxyribonucleic Acid Labeled with Azure Ⅰ

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【作者】 李韧韬龙云飞张永婷苏界殊

【Author】 LI Ren Tao LONG Yun Fei ZHANG Yong Ting SU Jie Shu (Institute of Chemistry and Chemical Engineering,Hunan Science and Technology University Xiangtan,Hunan 411201,P.R.China)

【机构】 湖南科技大学化学化工学院湖南科技大学化学化工学院 湖南省湘潭市411201湖南省湘潭市411201湖南省湘潭市411201

【摘要】 研究了生物染色剂天青 与脱氧核糖核酸在碱性条件下的结合反应 ,影响因素和最佳反应条件 ,建立了一种测定 DNA的新方法。在 p H=8.4的三羟甲基氨基甲烷 -盐酸 (Tris- HCl)缓冲溶液中 ,鱼精 DNA(fs DNA)及小牛胸腺 DNA(ct DNA)的线性范围分别为 0 .5— 10 .0 mg· L-1(fs DNA)、0 .5— 8.0 mg·L-1(ct DNA) ,相关系数为 0 .996 8(fs DNA)、0 .996 5 (ct DNA) ,表观摩尔吸光系数 ε60 9.90 nm(fs DNA) =2 .5×10 4L· mol-1· cm-1、ε60 9.90 nm(ct DNA) =3.1× 10 4L· mol-1· cm-1,用于合成样品的测定 ,结果令人满意

【Abstract】 A new spectrophotometric method for the determination of DNA was established based on the interaction between Azure Ⅰ and deoxyribonucleic acid(DNA) in pH8.4 medium.The effects of interference substances and optimization of procedure were investigated.The linear ranges are 0.5—10.0mg/L for fish sperm DNA and 0.5—8.0mg/L for calf thymus DNA.The correlation coefficient are 0.9968(fsDNA) and 0.9965(ctDNA),and the apparent molar absorption coefficient are ε 609.90nm (fsDNA)=2.5×10 4L·mol -1 ·cm -1 、 ε 609.90nm (ctDNA)=3.1×10 4L·mol -1 ·cm -1 ,respectively.The method has been applied to the determination of DNA in mixed samples with satisfactory results.

  • 【文献出处】 光谱实验室 ,Chinese Journal of Spectroscopy Laboratory , 编辑部邮箱 ,2004年02期
  • 【分类号】O657.32
  • 【被引频次】12
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