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不同表达载体对人白细胞介素-18原核表达效率的影响

The influence of different vectors on the expression level of human interleukin - 18 gene in E.coli

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【作者】 吉莉莉; 杨吉成; 孙万邦; 盛伟华; 李丽蛾;

【Author】 JI Li - li, YANG Ji - cheng, SUN Wan - bang, SHENG Wei - hua, Li Li - er (1. Department of Immunology , Zunyi Medical College , Guizhou Zunyi , 563003 China; 2. Department of Gene Research, Suzhou University , Jiangsu Suzhou , 215007 China)

【机构】 遵义医学院免疫学教研室; 苏州大学基因工程研究室; 苏州大学基因工程研究室 贵州 遵义; 563003; 江苏 苏州; 215007; 贵州 遵义; 215007;

【摘要】 目的 探讨PBV220及PJW2载体构建的rhIL-18重组质粒的IL-18表达效率。方法 将构建的PBV220/rhIL-18重组质粒中的rhIL-18酶切、克隆到表达载体PJW2中,经PCR产物电泳及测序鉴定,热诱导后在大肠杆菌中表达。结果 PJW2/rhIL-18表达的重组人IL-18占菌体总蛋白质的20%,而PBV220/IL-18重组质粒表达的重组人IL-18占菌体总蛋白质的16%。两者表达的蛋白质分子量约为18KD,与预期分子量相符。结论 PJW2载体rhIL-18表达效率高于PBV220,为下一步的纯化及提高蛋白产量打下了基础。

【Abstract】 Objictive To realize the expression level of rhIL - 18 that expressed by the recombinant plasmid PJW2 / IL - 18 and PBV220 / IL - 18. Methods The mature human interleukin - 18 gene picked from the recombinant plasmid PBV220 / IL - 18 which have been constructed before was cloned into thermo - sensitive vector PJW2 and it’s sequence was identified. The E. coli DH5α harbouring the two kinds of constructs expressed the same recombinant protein - rhIL - 18. Results the expression rate of PJW2 / IL - 18 was 20% while that of PBV220 / IL - 18 was 16% . Conclusion the expression level of PJW2 / IL - 18 was higher than that of PBV220/IL-18.

【关键词】 白细胞介素18; 表达; 载体; 大肠杆菌;
【Key words】 Interleukin - 18; expression; vector; E. coli;
  • 【文献出处】 遵义医学院学报 ,Acta Academiae Medicinae Zunyi , 编辑部邮箱 ,2003年01期
  • 【分类号】R392
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】67
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