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大鼠胚胎神经干细胞的冷冻复苏

Cryopreservation of neural stem cells derived from embryonic rats

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【作者】 马政文富赛里尹岚徐晓明陆佩华

【Author】 MA Zheng wen 1 , FU Sai li 1 , YIN Lan 1 , XU Xiao ming 1,2 , LU Pei hua 1 (1. Department of Neurobiology, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200025, China, 2. Kentucky Spinal Cord Injury Research Center, Department of Neurological Surgery,Louisville, KY 40292, USA)

【机构】 上海第二医科大学神经生物学实验室上海第二医科大学神经生物学实验室 上海200025中国上海200025中国美国肯塔基脊髓损伤研究中心美国路易斯威尔大学神经外科实验室肯塔基40292美国

【摘要】 目的 :建立大鼠胚胎神经干细胞冷冻复苏方法 ,探讨冻存后神经干细胞的活力及生物学特性。 方法 :采用 10 %BSA + 7.5 %DMSO作冷冻保护剂 ,于液氮中冻存 ;采用细胞培养和间接免疫荧光染色方法对冻存后细胞的活力、形态及分化能力作鉴定。结果 :不同的冻存时间、细胞代数、组织来源以及神经营养因子对冻存后细胞存活率没有明显差异 (P >0 .0 5 )。冷冻保存复苏后培养的大鼠胚胎神经干细胞能够存活 ,能在体外多次传代 ,并能分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。结论 :大鼠神经干细胞的冻存复苏并不影响其原有的生物学特性包括其正常的形态、增殖能力和多向分化能力。

【Abstract】 Objective:To establish a cryopreservation method for neural stem cells (NSC) obtained from embryonic rats and to study the viability and differentiation of these cells after cryopreservation. Methods:Stem cells in 10%BSA+7.5%DMSO were stored in liquid nitrogen. Cell culture and indirect immunofluorescence staining were used to identify the viability, morphology and differentiation of neural stem cells after cryopreservation. Results:Different time of cryopreservation, different passages, different sources of tissue and different trophins did not affect NSC survival ( P >0.05). After cryopreservation, embryonic neural stem cells could survive and expand in vitro for many passages, and differentiate into neurons, astrocytes and oligodendrocytes. Conclusion:Cryopreservation and resuscitation did not change biological properties of embryonic NSCs, including their morphology and capacity for expansion and differentiation. \[

【关键词】 胚胎神经干细胞冻存复苏
【Key words】 embryoneural stem cellcryopreservationresuscitation
【基金】 上海市高等学校科技基金 (99ZD0 8;99B2 0 );上海市科技发展基金 (0 0JC14 0 2 1)资助项目
  • 【文献出处】 中国神经科学杂志 ,Chinese Journal of Neuroscience , 编辑部邮箱 ,2003年02期
  • 【分类号】R329.2
  • 【被引频次】17
  • 【下载频次】416
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