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从小鼠单个植入前胚胎中扩增线粒体DNA研究

Amplification of Mitochondria DNA from Mouse Single Preimplantation Embryo

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【作者】 李军锋钱敏鲁成张家骅

【Author】 Li Junfeng 1,Qian Min 2,Lu Cheng 2,Zhang Jiahua 1* ( 1 Chongqing Key Lab of Forage & Herbivore College of Animal Science and Technology, Southwest Agriculture University,chongqing 400716; 2 Key Laboratory of Sericulture of the Ministry of Agriculture of China,Southwest Agricultural University,Chongqing 400716)

【机构】 西南农业大学重庆市牧草与草食家畜重点实验室西南农业大学农业部蚕桑学重点开放性试验室西南农业大学重庆市牧草与草食家畜重点实验室 重庆400716重庆400716重庆400716

【摘要】 用KOH DTT对小鼠单个卵子、 2 -cell胚、 8-cell胚、桑葚胚和囊胚进行处理 ,分别作为模板DNA ,并用PCR技术对其mtDNA的高变异区D -环区的 5′端 342bp片段进行扩增。结果 ,小鼠单个卵子、 2 -cell胚、 8-cell胚、桑葚胚或囊胚经KOH DTT处理后 ,紫外分光光度法测得DNA含量为 1 0~ 1 0 75mg ml,OD 2 6 0 OD 2 80值为 0 835~ 0 94 4;以这种DNA样品为模板 ,经一次PCR扩增即能获得清晰的目的DNA条带

【Abstract】 We have cultivated these cells from mice by KOH/DTT,such as single ovum,2-cell embryo,8-cell embryo,morula and blastocyst Then 5′ D-loop of mtDNA of these cells,which have 342 bp,have been amplification by PCR technology As a result,after these cells have cultivated by KOH/DTT,density of DNA,which has been tested by the mass UV-spectrophotometer,is 10~10 75 mg/ml and OD260/OD280 is 0 835~0 944 Acting these DNA as template DNA respectively,clear target DNA fragment could be attained by only one PCR amplification

【基金】 重庆市科委资助项目 ( 73 80 )资助
  • 【文献出处】 中国农学通报 ,Chinese Agricultural Science Bulletin , 编辑部邮箱 ,2003年05期
  • 【分类号】Q785
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