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用细胞内细胞因子染色方法检测HLA-A~*02个体CD8~+T细胞的免疫应答

The immune response of CD8~+T cells from subjects of different HLA-A~*02 subtype detected by intracellular cytokine staining

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【作者】 李若冰陈红松李丹费然丛旭范春蕾魏来王宇

【Author】 LI Ruo Bing, CHEN Hong Song, LI Dan et al. Institute of Hepatology, People’s Hospital, Beijing University,Beijing 100044,China

【机构】 北京大学人民医院肝病研究所北京大学人民医院血液病研究所HLA实验室北京大学人民医院肝病研究所 北京100044北京100044北京100044

【摘要】 目的 :用细胞内细胞因子染色方法 (ICCS)检测不同HLA A 0 2个体的CD8+ T细胞对流感病毒多肽的免疫应答状况。方法 :采用SSP法确定HLA A 0 2亚型 ;分离HLA A 0 2个体的外周血单个核细胞 (PBMC) ,与流感病毒特异的HLA A 0 2 0 1限制性CTL表位多肽 (IMP5 8 6 6 ,GILGFVFTL)孵育 ,ICCS检测CD8+ T细胞分泌细胞因子IFN γ、IL 2和TNF α。结果 :发现HLA A 0 2不同亚型的人PBMC对流感病毒多肽均具有记忆性免疫应答。结论 :①ICCS方法可特异性定量检测T细胞活化状态 ;②HLA A 0 2人群中普遍存在对IMP5 8 6 6多肽的记忆性免疫应答 ;③对于HLA A 0 2 0 1限制性多肽 ,与其它不同HLA A 0 2亚型间存在交叉反应性。

【Abstract】 Objective:Intracellular cytokine staining(ICCS) is applied to the detection of the immune response of peripheral blood mononuclear cells (PBMC)from subjects of different HLA A 02 supertype to influenza A matrix peptide.Methods:HLA A 02 subtype were identified by the way of SSP methods;PBMC from subjects with HLA A 02 were cocultured with influenza A matrix peptide (IMP) which was HLA A*0201 restricted CTL epitope, secreting cytokine such as IL 2, IFN γ,TNF α were measured by ICCS.Results:PBMC from HLA A 02 positive subjects had memory immune response to IMP.Conclusion:①The method of ICCS can be used for quantitive detecting T cell activating status specificly;②the memory immune response to IMP58 66 peptide exists in all of the HLA A 02 positive persons;③among different HLA A 02 subtype, there are cross reactivity to HLA A 0201restricted peptide.

【关键词】 细胞因子HLA-A02亚型免疫应答
【Key words】 CytokineHLA A 02 subtypeImmune response
【基金】 国家“8 63”项目 (编号 2 0 0 1AA2 1715 1);国家自然科学基金项目 (编号 :3 0 170 0 47);北京大学医学部“985”项目
  • 【文献出处】 中国免疫学杂志 ,Chinese Journal of Immunology , 编辑部邮箱 ,2003年04期
  • 【分类号】R392
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】259
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