蛇毒类凝血酶基因转染人外周血淋巴细胞的研究

【摘要】 目的　探讨大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶 (Gloshedobin ,GSB)基因转染人外周血淋巴细胞而达到溶栓和防栓的效果。方法　应用PCR及PCR重组技术 ,将GSB基因克隆入逆转录病毒载体pLNCX ,以脂质体介导转染人外周血淋巴细胞 ,并借助于IL 2的分泌通路 ,使GSB分泌至胞外。转染后从mRNA、DNA和蛋白质水平检测GSB的表达情况。结果　转染后 2 4h、48h、72h ,mRNA和DNA水平均有外源基因GSB的表达 ;蛋白质SDS PAGE在 30kD左右出现一条带 ;转染上清于 40 5nm波长处测得精氨酸酯酶的OD值为 0 332～ 0 349。结论　GSB基因在人外周血淋巴细胞中表达 ,并分泌至胞外 ,且转染上清具有精氨酸酯酶活性。更多还原