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菌体中大量抽提质粒DNA方法的改进

Improving the technique to prepare plasmid DNA from Escherichia coli on a large scale

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【作者】 陈显久胥显民牛勃解军杨琦张悦红张东昌

【Author】 CHEN Xian-jiu ,XU Xian-min,NIU Bo,XIE Jun,YANG Qi,ZHANG Yue-hong,ZHANG Dong-chang. Department of Biochemistry and Molecular Biology of Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China

【机构】 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室山西省眼科医院眼底病科 030001030001030001

【摘要】 目的 建立简便、快捷的大量制备质粒的实验方法。方法 以文献报道方法为依据 ,将传统的质粒小量抽提的实验方法与大量抽提的实验方法有机结合 ,以琼脂糖凝胶电泳的方法证明了使用改进后方法的可行性。结果 使用该法可以一次大量地制备质粒DNA ( 690± 2 19) μg ,提取效力为 ( 1 4± 0 4) μg/ml菌液 ,并可直接用于酶切。结论 改进后的实验方法更加简便、快捷、高效 ,为分子生物研究中质粒的大量制备提供了更加实用的实验方法

【Abstract】 Objective To establish a more convenient technique for large-scale preparation of plasmid DNA from Escherichia coli than before.Methods Based on the literature′s method,the author reasonably combined the conventional small-scale extraction technique with a large-scale one,and then checked the feasibility of the newly improved technique by agarose gel electrophoresis.Results Its production output was (690±219) μg plasmid DNA at one time,extraction rate was (1.4±0.4) μg per milliliter culture medium.The product can be directly digested by restriction enzyme.Conclusion The improved technique is more convenient than before,which provides a practical method for large-scale preparation of plasmid DNA.

【关键词】 质粒DNA抽提大肠杆菌
【Key words】 PlasmidDNAExtractionEscherichia coli
【基金】 山西省归国留学人员基金资助项目 ( 2 0 0 0 41)
  • 【文献出处】 中国药物与临床 ,Chinese Remedies & Clinics , 编辑部邮箱 ,2003年02期
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】7
  • 【下载频次】833
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