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中国玉米新品种DNA指纹库建立系列研究 Ⅲ.多重PCR技术在玉米SSR引物扩增中的应用

Series of Research on Establishing DNA Fingerprinting Database of Chinese New Maize Cultivars Ⅲ.Multiplex PCR Applied in Maize SSR Amplification

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【作者】 王凤格赵久然佘花娣郭景伦陈刚廖琴孙世贤陈如明

【Author】 WANG Feng-ge 1 ,ZHAO Jiu-ran 1 ,SHE Hua-di 1,2 ,GUO Jing-lun 1 ,CHEN Gang 1 ,LIAO Qin 3 ,SUN Shi-xian 3 ,CHEN Ru-ming 4 (1.Maize Research Center,Beijing Academy of Agricultural and Forestry Sciences,Beijing100089,China;2.Heibei Agricultural University,Heibei Baoding071001,China;3.The Whole Country’ Service Center on Agricultural Technique Popularization,Beijing100026,China;4.Plant New Variety Protection Office,Agricultural Ministry,Beijing100026,China)

【机构】 北京市农林科学院玉米研究中心,北京市农林科学院玉米研究中心,北京市农林科学院玉米研究中心,北京市农林科学院玉米研究中心,北京市农林科学院玉米研究中心,全国农技推广服务中心,全国农技推广服务中心,农业部植物新品种保护办公室 北京100089,北京100089,北京100089河北农业大学,河北保定071001,北京100089,北京100089,北京100026,北京100026,北京100026

【摘要】 根据21对玉米SSR引物扩增片段大小范围组成不同的引物组合进行多重PCR反应的研究。在与单一PCR相同的反应条件下,47个两重PCR组合出现5种不同的扩增情况,其中30个组合扩增正常;10个三重PCR组合中有9个组合扩增正常;两个四重PCR组合中有1个扩增正常,这些筛选出的正常扩增的组合可应用于今后玉米DNA指纹库构建研究中。研究表明,应用与单一PCR完全相同的反应条件,大部分能够获得正常扩增的多重PCR组合,在此基础上提出了简化的多重PCR优化程序。

【Abstract】 Twenty-one pairs of maize SSR primers were used for building various multiplex-PCR-sets accord-ing to their amplified bands’ size range.Under the same conditions as single PCR reaction,47two-PCR-sets ap-peared five different amplification behaviors,of which30were amplified normally.Nine of10three-PCR-sets and one of2four-PCR-sets were amplified normally.These screened normally-amplified multiplex-PCR-sets could be applied in maize DNA fingerprinting database.The results showed that most multiplex-PCR-sets could be amplified normally under just the same conditions as single PCR.Based on our experience,we proposed a simplified protocol for developing a multiplex PCR assay.

【关键词】 玉米SSR多重PCRDNA指纹库
【Key words】 MaizeSSRMultiplex PCRDNA fingerprinting database
【基金】 农业部及北京市重点科技项目(H030730010690)
  • 【文献出处】 玉米科学 ,Journal of Maize Sciences , 编辑部邮箱 ,2003年04期
  • 【分类号】S513
  • 【被引频次】108
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