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木聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达及表达蛋白的纯化

Expression of Xylanase B Gene of Thermotoga maritima in Escherichia coli

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【作者】 薛业敏曹建平毛忠贵邵蔚蓝

【Author】 XUE Yemin,CAO Jianping,MAO Zhonggui, SHAO Weilanof Education, Southern Yangtze University, Wuxi 214036, China)

【机构】 江南大学工业生物技术教育部重点实验室江南大学工业生物技术教育部重点实验室 江苏无锡214036江苏无锡214036江苏无锡214036

【摘要】 热海栖热袍菌Thermotogamaritima是一个嗜极端高温的厌氧细菌,其产生的耐高温和热稳定性的木聚糖酶B具有很好的工业应用前景.利用PCR技术将嗜热产乙醇菌T.maritima编码高度热稳定性木聚糖酶的基因克隆至原核表达载体pET-20b,使之与组氨酸标签融合,并在大肠杆菌JM109(DE3)中得到了高效表达.最后采用金属Ni2+螯和层析柱对基因表达产物进行了纯化.

【Abstract】 Thermotoga maritima is one of the few hyperthermophilic bacteria described to date. The xylanases found in T. maritima has shown the extremely thermostablity and considerable potential in largescale production. The gene of xylanaseB from T. maritime ATCC 43589 was amplified by PCR, inserted into the plasmid pET20b, and fused with the 6His tag. The resultant recombinant plasmid pET20bXynB was transformed to E.coli JM109(DE3). A gene product band can be seen with SDSPAGE. The recombinant protein was purified by heating and immobilizing metal affinity chromatography.

【关键词】 木聚糖酶BPCR扩增表达纯化
【Key words】 xylanase BPCR amplificationexpressionisolation
  • 【文献出处】 无锡轻工大学学报 ,Journal of Wuxi University of Light Industry , 编辑部邮箱 ,2003年03期
  • 【分类号】Q786
  • 【被引频次】36
  • 【下载频次】396
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