快速、有效筛选新的功能基因——荧光差异显示技术

【摘要】 控制生物性状的基本单位是基因 ,研究细胞的基因表达一直是分子生物学的重要课题之一。不同细胞间基因表达的差异决定了生命活动的多样性 ,如发育与分化、内环境稳定、细胞周期调节等。近年来 ,随着DNA重组技术的发展 ,已有数万个人类基因被克隆分析 ,要从如此众多的表达基因中找出引起细胞生理或病理变化的基因并非易事。应用荧光标记的mRNA差异显示技术将有可能在一定程度上起到关键的作用。以总RNA为模板 ,采用荧光标记的锚定引物 ,通过逆转录、差异显示PCR反应 ,经 5 6 %变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异条带 ,条带清晰、明亮、背景低 ,各样本间的差异不仅呈有无的变化 ,亦表现出很多强弱改变 ;本实验室经过多年的坚持摸索、研究 ,现已能成功的应用荧光标记差异显示技术 ,可快速 (2d)、敏感、经济有效的筛选各种未知的表达基因更多还原