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人白细胞介素-24基因的克隆及序列测定

Cloning and Sequencing of cDNA Encoding Human Interleukin-24

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【作者】 陈雄艳李丽娥盛伟华龚爱华缪竞诚杨吉成

【Author】 CHEN Xiong-yan, LI Li′e, SHENG Wei-hua, et al (Department of Cellular and Molecular Biology, Medical school of Suzhou University, Suzhou 215007,China)

【机构】 苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室 苏州215007苏州215007苏州215007

【摘要】 目的 克隆人白细胞介素 - 2 4 (hIL - 2 4 )基因 ,以供重组表达。方法 利用自行设计合成的一对引物 ,采用RT -PCR技术从LPS活化的人外周血单个核细胞的总RNA中分离hIL - 2 4cDNA并重组到 pUC19载体上 ,进行酶切鉴定和DNA序列测定。结果 PCR及酶切产物电泳结果均证明所克隆的基因为 6 2 1bp。经序列测定证实所克隆的hIL - 2 4与GenBank报道的结果完全一致。结论 该基因系国内首次获得并经序列测定证实的hIL - 2 4cDNA基因。这为进一步在真核或大肠杆菌中高效表达有活性的重组hIL - 2 4 ,更深入地研究其作用机制以及临床应用奠定了坚实的基础。

【Abstract】 Objective Extract gene fragment of hIL-24 for further recombinant expression. Methods cDNA fragment encoding hIL-24 was amplified from LPS-stimulated human peripheral blood mononuclear cells by reverse transcription(RT)-PCR and inserted into pUC19 plasmid,identified by endonuclease digestion and DNA sequencing. Results cDNA encoding human interleukin-24 was cloned into cloning vector pUC19 and verified by endonuclease digestion and sequencing. Conclusion This is the first time for us to get the human IL-24 cDNA clone in China. This study paves the way for future research in expression of hIL-24 in eukaryotic cells and E.coli . and in mechanism of hIL-24 action and clinical application of hIL-24.

【关键词】 人白细胞介素-24RT-PCR基因克隆序列测定
【Key words】 hIL-24RT-PCRmolecular cloningsequencing
  • 【文献出处】 苏州大学学报(医学版) ,Acta Academiae Medicinae Suzhou , 编辑部邮箱 ,2003年03期
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】18
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