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人血管抑素克隆表达及抑制血管生成的研究

Cloning and Expression of Recombinant Human Angiostatin and Its Antiangiogenic Activity

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【作者】 郑凯; 张绍增; 王养民; 衡玲;

【Author】 ZHENG Kai,ZHANG Shao-zeng,WANG Yang-min,et al. Department of Urology,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi′an,710032

【机构】 第四军医大学西京医院泌尿外科; 兰州军区总医院全军泌尿外科中心; 兰州军区总医院全军泌尿外科中心 710032; 730050;

【摘要】 目的 研究并获得重组人血管抑素 (angiostatin) ,探讨其临床应用价值。方法 采用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR )方法 ,从人胚胎肝细胞中扩增出人全长血管抑素cDNA片段。用原核细胞表达载体构建 pBV 2 2 0 /angiostatin重组质粒 ,并将其转化大肠杆菌DH 5α进行表达 ,初步纯化。应用鸡胚尿囊膜血管生成实验及脐静脉内皮细胞增殖实验检测其活性。结果 经SDS PAGE分析 ,表达产物相对分子量约 3 8kD ,薄层扫描显示表达产物可达细菌总蛋白的 3 0 %。活性实验显示 ,重组蛋白能够抑制血管形成。结论 重组人Angiostatin在大肠杆菌中实现高效表达 ,并具有很好的生物学活性

【Abstract】 Objective To express recombinant human angiostatin for further clinical application.Methods One amplification angiostatin cDNA fragment was obtained from the human embryo hepatic cells by RT-PCR method and cloned into prokaryotic to express vector pBV220 and transform into E.coli DH5α.The activities of angiostatin protein were examined by the endothelial cell inhibition assay and the chicken-embryo chorioallantoic membrane assay.Results SDS-PAGE analysis showed that expressed product was about Mr 38 kD and about 30% of bacterial total protein.Conclusion Recombinant human angiostatin can be expressed efficiently with biological active in E.coli DH5α.

【关键词】 血管抑素; 基因表达; 抗血管生成;
【Key words】 Angiostatin; Gene expression; Antiangiogenesis;
【基金】 全军医药卫生科研基金资助 (0 1MA0 1 1 7)
  • 【文献出处】 实用癌症杂志 ,The Practical Journal of Cancer , 编辑部邮箱 ,2003年06期
  • 【分类号】R73-36
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