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用噬菌体展示筛选Gal-α-1,3-Gal的模拟肽

Identification of Gal-α-1,3-Gal Peptide Mimetic by Phage Display

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【作者】 张晖詹金彪许林海严志焜王克夷

【Author】 ZHANG Hui, ZHAN Jin-Biao ** (Department of Biochemistry, School of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310006, China) XU Lin-Hai, YAN Zhi-Kun (Department of Surgery, Peoples Hospital of Zhejiang Province, Hangzhou 310014, China) WANG Ke-Yi (Shanghai Institute of Biochemistry and Cell Biology, The Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China)

【机构】 浙江大学医学院生物化学教研室浙江省人民医院中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所 杭州310006杭州310006杭州310014上海200031

【摘要】 猪心移植是解决心脏移植供体少的有效方法 .由于猪心血管内皮细胞表面抗原半乳糖 α 1,3 半乳糖 (Gal α 1,3 Gal) ,能与人体内预存的天然抗体结合产生超急性排斥反应 (HAR) ,而无法应用于临床 .为了解决这一难题 ,应用噬菌体展示技术 ,筛选出一个能与抗B型血单克隆抗体 (mABanti B)特异性结合的阳性噬菌体克隆 ,应用酶联免疫吸附测定 (ELISA)和竞争性ELISA结果表明 ,所获得的阳性噬菌体克隆能特异性地与mABanti B结合 ,并且这种结合可被蜜二糖 (具有Gal α 1,6 Glc的结构 )所竞争抑制 .由此推测 ,筛选到的噬菌体阳性克隆很可能就结合在蜜二糖与mABanti B结合的位点 .同时 ,进行了阳性噬菌体克隆的抑制猪红细胞凝集活性试验 ,试验结果表明 ,此阳性克隆不仅可抑制Gal α 1,3 Gal与抗体的结合 ,也可抑制Gal α 1,3 Gal与西非单叶豆凝集素 (GS I B4)的结合 .此噬菌体阳性克隆测序后 ,得小肽序列为CCWLLRQPVRFVRSIRS .鉴于以上的结果 ,认为此小肽可以作为Gal α 1,3 Gal的模拟肽 ,同时有望开发成抗猪器官异种移植超急性排斥反应的新药

【Abstract】 The obstacle for pig-to-human transplantation is hyperacute rejection (HAR) triggered by the interaction between human natural antibodies and the antigenic epitope Gal-α-1,3-Gal. The α-Gal structure is considered to be the major xenoantigenic epitopes present on porcine tissues. A phage-displayed peptide library is used to identify a 17-amino-acid peptide CCWLLRQPVRFVRSIRS that binds to the mAb anti-B (anti-B monoclonal antibody which binds the carbohydrate Gal α-1,3 Gal).The melibiose competes with the binding of mAB anti-B to the peptide, suggesting that they may bind the same site. Using a pig RBC agglutination assay, it is shown that this peptide can inhibit the agglutination of pig RBCs by human serum or GS-I-B4.

【基金】 浙江省人民医院“抗移植排斥新药”课题资助~~
  • 【文献出处】 生物化学与生物物理进展 ,Progress In Biochemistry and Biophysics , 编辑部邮箱 ,2003年03期
  • 【分类号】R346
  • 【被引频次】4
  • 【下载频次】107
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