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检测组织激肽释放酶基因寡核苷酸多态性方法的建立

A Method for Detecting of DNA Polymorphisms of Tissue Kallikrein Gene by ASO Blot Hybridization Technique

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【作者】 陈晨韦芳王正荣

【Author】 Chen Chen,Wei Fang,Wang Zhengrong (Biological Engineering Department,Sichuan University,Chengdu 610041)

【机构】 四川大学基础与法医学院生物医学工程研究室四川大学基础与法医学院生物医学工程研究室 成都610041成都610041成都610041

【摘要】 目的 :检测组织激肽释放酶启动子区寡核苷酸多态性 ,为开展基因诊断高血压研究奠定基础。方法 :人外周静脉抗凝血提取基因组DNA ,PCR扩增目标启动子片段 ,ASO(allele specificoligonucleotide)斑点杂交检测基因型 ,并与测序法比较了解启动子等位基因多态性。结果 :有 4例杂交结果阳性 ,与测序结果吻合。结论 :应用ASO斑点杂交技术检测该寡核苷酸多态性与测序法比较具有简便 ,快速 ,价廉 ,特异性高等优点 ,适于大规模人群筛查 ,是一种值得推广的研究方法

【Abstract】 s Objective: To detect DNA polymorphism in the 5’ flanking region of the human tissue kallikrein gene promoter. Methods: Total DNA was extracted from whole blood,target promoter fragment was amplified by PCR, then detected by hybridization with the oligonucleotide probe and direct DNA sequencing. Results: The results of hybridization were coincident with those of DNA sequencing. Conclusion: ASO(allele specific oligonucleotide) blot hybridization technique is more economical than DNA sequencing to be used to detect the 5’ flanking polymorphism of tissue kallikrein gene promoter.

【基金】 国家自然科学基金资助 (39970 27530 0 70 2 78)
  • 【文献出处】 四川生理科学杂志 ,Sichuan Journal of Physiological Sciences , 编辑部邮箱 ,2003年01期
  • 【分类号】R346
  • 【下载频次】38
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