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兔防御素NP1在大肠杆菌中的表达

THE EXPRESSION AND PURIFICATION OF FUSION PORTEIN GST-NP1 IN E.Coli

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【作者】 徐文生许杨

【Author】 XU Wen-sheng,XU Yangd Science,Nanchang University,Nanchang 330047,China)

【机构】 南昌大学中德联合研究院食品科学教育部重点实验室南昌大学中德联合研究院食品科学教育部重点实验室 江西南昌 330047江西南昌 330047

【摘要】 通过选用大肠杆菌偏好密码子对兔防御素基因进行改造,人工合成兔防御素基因并构建编码GST-NP1融合基因,从而在大肠杆菌中进行表达。研究表明:表达的蛋白质经过亲和层析洗脱纯化,SDS-PAGE电泳分析,在目的分子量处出现预期条带。灰度扫描分析表明,表达量最高可达细菌总蛋白的34.7%。经切割、复性后的防御素具有溶血活性。

【Abstract】 The codons of rabbit defensin NP1 gene were modified to eliminate the E.Coli rear codons. The coding region of defensin NP1 was cloned into plasmid pGEX-4T-1, and the fusion protein was expressed in E.Coli JM109.Preliminary study showed that after affinity chromatography there are only one protein band on SDS-PAGE gel. The fusion protein was expressed up about34.7% of total bacterial proteins, and exhibited hemolysis activity after digestion by CNBr and renaturation.

  • 【文献出处】 南昌大学学报(理科版) ,Journal of Nanchang University(Natural Science) , 编辑部邮箱 ,2003年03期
  • 【分类号】Q784
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】86
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