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珂字201胚性愈伤组织cDNA文库的构建和分析(英文)

The Construction of Embryogenic Callus cDNA Library of Upland Cot-ton cv. Coker 201

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【作者】 李惠英张献龙聂以春

【Author】 LI Hui-Ying, ZHANG Xian-Long,NIE Yi-Chun (National Key Laboratory of Crop Genetic Improvement, Huazhong Agricultural University , Wuhan 430070,China)

【机构】 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室 武汉 430070武汉 430070武汉 430070

【摘要】 用经过改进的胍盐法提取了陆地棉品种珂字201胚性愈伤组织的总RNA,进而分离了mR-NA,合成了全长cDNA,并将其克隆到λTripIEx载体中,进行体外包装后,成功地获得了cDNA文库。该文库的滴度为2.02×107pfu·ml~1,重组效率在90%以上,插入片段大小范围也符合cDNA文库构建的要求。

【Abstract】 The embryogenic callus total RNA was extracted by a modified guanidinium salt method, then mRNA was isolated using Mcs-sageMaker reagent from upland cotton cv. Coker 201. Full-length cDNA was synthesized and cloned into phage λTriplEx 2 vector employing Clontech kit. After being packaged in vitro, the tiler of the library was measured as 2. 02 × 107 pfu·ml1 ,and the recombination rate was above 90%. The insert fragments also met the requirement of a good cDNA library.

【基金】 国家“863”项目(200lAA2lll21);国家“948”项目(201012)资助
  • 【文献出处】 棉花学报 ,Acta Gossypii Sinica , 编辑部邮箱 ,2003年04期
  • 【分类号】S562
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】87
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