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巨龙竹基因组DNA的提取及RAPD反应条件的优化

Extraction of Genomic DNA and Optimization of RAPD Condition for Dendrocalamus sinicus Chia et J. L. Su.

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【作者】 普晓兰李鹏杜凡

【Author】 PU Xiao-Ian, LI Peng, DU Fan(1. Nanjing Forestry University, Jiangsu Nanjing 210037, China; 2. Southwest Forestry College,Kunming 650224, China)

【机构】 南京林业大学西南林学院西南林学院 江苏 南京 210037 西南林学院云南 昆明 650224云南 昆明 650224

【摘要】 用改良CTAB法从巨龙竹硅胶干燥的叶片中提取基因组DNA,成功地进行RAPD扩增。通过正交法对RAPD反应条件优化,6个试验因子的最适条件为:模板DNA1~1.5ng/μl,引物0.8~1.0μmol/L,dNTPs0.1~0.15mmol/L,Mg2+ 2.0~2.5mmol/L,Taq酶0.5~1.0U,退火温度35~36℃。

【Abstract】 An improved CTAB method of DNA extraction is applied to obtaining genomic DNA from silica gel dried leaves of Dendrocalamus sinicus Chia et J. L. Su. The DNA is successfully used for RAPD analysis. In this paper, six essential factors that might affect the result of RAPD are compared and optimized by applying orthogonal experiment. The result shows that the optimal conditions of six factors in RAPD - PCR reaction system are DNA 1 ~ 1. 5ng/μl; random primer 0.8-1.0/μol/L; dNTPs 0.1-0.15mmol/L; Mg2+ 2. 0 ~ 2. 5mmol/L; Taq polymerase 0.5- 1.0U; annealing 36-37℃.

【关键词】 巨龙竹基因组 DNARAPD
【Key words】 dendrocalamus sinicus chia et J. L. Sugenomic DNARAPD
【基金】 国家教委资助项目
  • 【文献出处】 昆明理工大学学报(理工版) ,Journal of Kunming University of Science and Technology , 编辑部邮箱 ,2003年01期
  • 【分类号】Q943
  • 【被引频次】36
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