丙型肝炎病毒全长cDNA克隆在Huh7细胞中的表达与复制

【摘要】 目的　了解丙型肝炎病毒 (HCV)在体外的复制和表达情况。 方法　 利用HCV全长cDNA克隆构建表达质粒p3.1HCV并转染Huh7细胞。应用RT -PCR ,Westernblotting分析病毒正、负链RNA ,蛋白表达和剪切。 结果　在转染p3.1HCV的Huh7细胞中可检出相应病毒的正、负链RNA、Westernblotting在转染p3.1HCV的Huh7细胞检测中可检到针对HCVNS3蛋白、分子量约 70kD的特异性条带。 结论　HCV可以在体外培养的Huh7细胞中复制且其前体蛋白能在Huh7细胞中完成剪切更多还原