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重组克隆PCR扩增快速筛选方法的建立

Rapid screening of recombinant clone by PCR

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【作者】 赵勤赵国强刘康栋刘栋金戈赵继敏董子明

【Author】 ZHAO Qin,ZHAO Guoqiang,LIU Kangdong, LIU Dong, JIN Ge,ZHAO Jimin,DONG Ziming School of Basic Medical Sciences, Zhengzhou University 450052

【机构】 郑州大学基础医学院郑州大学基础医学院 郑州450052郑州450052郑州450052

【摘要】 目的 :建立PCR扩增快速筛选重组克隆的方法。方法 :利用载体本身的启动子序列和目的片段的特异性引物作为引物 ,通过合理搭配 ,用常规PCR方法扩增待检重组克隆。结果 :可以方便地筛选出重组克隆以及顺向和反向重组克隆 ,与传统的酶切鉴定结果一致。结论 :该方法可以快速、准确的筛选重组克隆 ,并能够确定片段插入的方向和大小。

【Abstract】 Aim:To set up a new method for rapid screening of recombinant clone.Methods:By taking the DNA sequences from the plasmid vector and sequences from the inserted gene as the primer pairs, a RCR based recombinant clone screening method was established.Results:The positive clone and orientation of DNA insertion were conveniently determined and the results were in good accordance with those by traditional restriction enzyme methods.Conclusion:This method could screen recombinant clone rapidly, while identifying the orientation and length of the inserted sequence.

【关键词】 重组克隆筛选PCR
【Key words】 recombinant clonescreeningPCR
【基金】 国家自然科学基金资助项目  3 9870 2 87
  • 【文献出处】 郑州大学学报(医学版) ,Journal of Zhengzhou University(Science Medical) , 编辑部邮箱 ,2003年04期
  • 【分类号】Q785
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】144
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