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以dsRNA为模板的梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究

Study on the RT-PCR Detection System for Pear vein yellow virus by Using dsRNA as Template

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【作者】 牛建新刘连科朱军覃伟铭

【Author】 Niu Jianxin,Liu Lianke,Zhu Jun,and Qin Weiming (Department of Horticulture&Forestry Engineering,Agricultural College of Shihezi University,Shihezi,Xinjiang832003China)

【机构】 石河子大学农学院园艺园林工程系石河子大学农学院园艺园林工程系 新疆石河子832003新疆石河子832003新疆石河子832003

【摘要】 用已知带梨脉病毒(Pearveinyellowvirus,PVYV)的库尔勒香梨植株和库尔勒香梨无病毒实生苗为供试材料,分别选用新鲜幼嫩叶片、4℃条件下保存2~4d的幼嫩叶片、冷冻的幼嫩叶片和皮层为试材,进行dsRNA的分离提取实验,得到了与PVYV基因组RNA长度9306bp相当大小的dsRNA谱带,并以dsRNA为模板,利用设计的特异引物,研究建立了梨脉黄病毒(PVYV)的RT-PCR检测技术体系,能有效地扩增出PVYV的一条长为316bp的特异片段,该技术可广泛用于果树病毒的分子检测。

【Abstract】 The double-strand RNA(dsRNA)from fresh,refrigerated(4℃2~4days),freezen leaf and bark of Korlaxiangli pear variety infected with Pear vein yellow virus(PVYV)and virus-free seedling were extracted respectively.PVYV dsRNA about 9306bp(PVYV genome length)was obtained.Using dsRNA as template,the RT-PCR detection system of PVYV based on dsRNA template with differential primers were developed.A316bp specific nucleotide fragment of PVYV was ef-fectively amplified by this system.The technology can be used for the molecular detection of fruit tree viruses comprehensive-ly.

【基金】 国家自然科学基金资助项目(30060053);教育部科学技术研究重点项目。
  • 【文献出处】 果树学报 ,Journal of Fruit Science , 编辑部邮箱 ,2003年02期
  • 【分类号】S436.612
  • 【被引频次】36
  • 【下载频次】200
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