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纯化膜蛋白质复合体Cyt b6f的新方法

A NEW METHOD FOR PURIFING Cyt b 6f PROTEIN COMPLEX 

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【作者】 毛大璋闫久胜翟小京孙钦秒李良璧

【Author】 MAO Da Zhang YAN Jiu Sheng ZHAI Xiao Jing SUN Qin Miao LI Liang Bi (Institute of Botany, The Chinese Academy of Sciences, Beijing 100093)

【机构】 中国科学院植物研究所

【摘要】 建立了纯化光合膜蛋白质复合体Cytb6f的新方法。与现有方法相比,新方法简单明了,只包括透析离心和用硫酸铵分级沉淀两个步骤,而且适于大批量制备。按此方法从菠菜叶绿体分离纯化的制剂含9.8nmolCytf·mg-1;SDSPAGE显示4条主要区带及1条低分子量区带,背景干净;Cytb6(b型血红素)∶Cytf=2∶1(mol∶mol),Chla∶Cytf=1∶1(mol∶mol);酶活性(PQ2H2→Cytc)80μmolCytc·nmolCytf-1·h-1左右;产率可达38%。

【Abstract】 A new protocol which is much simpler than current procedures, has been developed for purification of the Cyt b 6f protein complex. The protocol contained only two steps——dialysis centrifugation and stepwise precipitation with ammonium sulfate. Moreover, this method is suitable for larger scale preparation. The purified complex from spinach (Spinacia oleracea L.) contained 9.8 nmol Cyt f per milligram protein. 2 Cyt b 6(b hemes) and 1 Chl a per Cyt f. SDS PAGE showed four main bands and one weak band with low molecular weight. Its activity(PQ 2H 2→Cyt c)was around 80 μmol Cyt c·nmol Cyt f -1 ·h -1 .

【关键词】 膜蛋白Cytb6f纯化
【Key words】 Membrane proteinCyt b 6f complexPurification
【基金】 国家自然科学基金,国家空间计划资助
  • 【文献出处】 植物学报 ,ACTA BOTANICA SINICA , 编辑部邮箱 ,1998年11期
  • 【分类号】Q946.1,
  • 【被引频次】6
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