反义核酸真核表达载体的构建及其对重组HeLa细胞H654中IVS-2-654C→T突变β-珠蛋白基因剪接缺陷的抑制作用

【摘要】 在原工作的基础上 ,将非细胞系统中证明有效的反义片段通过高效真核表达载体 pCDNA3导入能稳定表达IVS 2 6 5 4C→T突变 β 珠蛋白基因的重组HeLa细胞 (H6 5 4)中 .结果显示 ,转染后第 3天 ,H6 5 4细胞内正常剪接的β 珠蛋白mRNA水平 ( β/( β + β ) )明显上升 ,从 0 0 7上升到 0 2 2 ,并维持到第 1 5天 ,最高达到0 43.实验表明构建的反义片段真核表达载体在细胞中能稳定转录反义RNA并有效抑制IVS 2 6 5 4C→T突变β 珠蛋白基因的异常剪接 ,为开展反义核酸治疗剪接缺陷型遗传性疾病提供了更直接的科学依据更多还原