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大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶基因克隆及其原核表达载体构建、表达
【摘要】 通过 PCR方法克隆出大肠杆菌株H-30的胞嘧啶脱氨酶(CD,cytosine deami-nase, EC 3.5.4.1)基因,并将其起始密码子 GTG突变为 ATG,构建了 CD基因的原核重组表达载体pBV220-CD,通过测定胞嘧啶脱氨酶活性筛选出CD高表达活性克隆H-30-CD-11,5-氟胞嘧啶(5-FC,5-fluorocytosine)对CD活性克隆有杀灭毒性.DNA序列分析显示 CD高表达活性克隆H-30-CD-11较基因文库中所报道的CD基因存在16个位点碱基改变,引起肽链中氨基酸改变的位点有5个.
【关键词】 胞嘧啶脱氨酶基因;
原核表达载体;
SDS-PAGE分析;
酶活性分析;
CD高表达活性克隆;
【基金】 国家“八六三”生物高技术项目
- 【文献出处】 科学通报 ,Chinese Science Bulletin , 编辑部邮箱 ,1997年19期
- 【分类号】R346
- 【被引频次】3
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