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枯草杆菌蛋白酶E基因多位点定点突变库的构建及其筛选
【摘要】 利用化学合成的15个寡聚核苷酸片段作为诱变引物,同时对枯草杆菌蛋白酶E(Subtilisin E或Apr E)基因进行体外突变,获得了合全部突变位点各种随机组合突变的突变库,通过点杂交法和DNA序列分析肯定了该突变库的可靠性.从突变库中选择一单点突变(Met222Ala)和3点突变(Asn76Asp/Asn109Ser/Ile205Cys)的基因进行克隆、表达和产物的酶学性质研究,发现其抗氧化性和热稳定性分别比野生型的有显著提高,与文献报道的一致.表明了该突变库在枯草杆菌蛋白酶工程研究中的应用价值.
【关键词】 定点突变；
多位点定点突变；
蛋白质工程；
Subtilisin E；
【基金】 联合国工业发展组织(UNIDO)基金资助项目
- 【文献出处】 中国科学C辑:生命科学 ,Science in China,Ser.C , 编辑部邮箱 ,1997年02期
- 【分类号】Q933
- 【被引频次】1
- 【下载频次】199