遗传转化选择培养基的改良

【摘要】 用根癌农杆菌（Agrobacteriumtumefacirens）的Ti质粒进行植物基因转移的遗传操作过程中，必须配制含一定浓度卡那霉素（Km）和校等青霉素（Cb）的NBK和MS选择培养基。Km是遗传转化选择剂，Cb是剩余工程菌生长抑制剂k’，两者均不耐高温。高压灭菌后只能待琼脂培养基自然冷却到45”C左右（盛培养基的容器不烫手）时再另加入并摇匀，趁培养基尚未凝固这一段时间内及时分装到50～100ml的三角瓶中。显然，这在实际操作上较为麻烦：（回）培养基高压灭菌后必须随时观察它的温度变化；（2）安排稍有不周就会耽误其它事情；（3）时间太紧迫，往往在培养基尚未分装完毕时就开始凝固，尤其是在实验室更多还原