丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3在昆虫细胞的表达及其初步免疫学特性的评价

【摘要】 ＮＳ３的基因工程表达产物，国外的报道有来自不同的表达系统，国内的报道大多采用大肠杆菌作为表达系统。杆状病毒表达系统具有表达外源蛋白的效率高、表达产物的生化理化特性与天然产物相似、操作简便、费用低等优点。参考Ｔｏｍｅｉ等人关于ＮＳ３的特异性主要抗原决定簇定位的研究报道，通过逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）从丙肝患者的血清中分离出编码ＨＣＶ非结构蛋白ＮＳ３的ｃＤＮＡ基因片段，此基因位于ＮＳ３区的中部（３８５９－４７２９），大约为全部ＮＳ３的二分之一长。并将其克隆到杆状病毒转移质粒上构建重组转移质粒。用此重组转移质粒ＤＮＡ与线性的杆状病毒ＤＮＡ共转染Ｓｆ９昆虫细胞，经蚀斑筛选获得了带有编码ＮＳ３更多还原