用荧光标记、流式细胞仪无茵分选法建立二次杂交瘤

【摘要】 双功能抗体（ＢｓＡｂ），即一个单抗分子具有两种不同抗原特异性结合能力，是近年来一种新型免疫治疗剂。ＢｓＡｂ的产生可通过化学交联技术、细胞融合技术或基因工程技术及二次杂交技术。二次杂交瘤可以是杂交瘤与脾细胞的融合（三源杂交源，ｔｒｉｄｏｍａｓ），也可以是两种杂交瘤细胞之间的融合（四源杂交源，ｔｅ－ｔｒａｄｏｍａｓ）。显然，应用两种已鉴定好的杂交瘤细胞作融合，在抗体的筛选与鉴定上优于杂交瘤与脾细胞的融合，因此，本文通过化学诱变产生的抗ＣＤ３ＨＡＴ敏感（ＨＧＲＴ－）细胞株标记荧光后与抗ＨＢｘＡｓ杂交瘤融合，应用流式细胞分选仪（ＦＡＣＳ）无菌分选建立了抗ＣＤ３／抗ＨＢｘＡｇ二次杂交瘤。抗ＨＢｘＡｇ杂交更多还原