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钝齿棒杆菌YL1基因文库的建立及异亮氨酸基因在大肠杆菌中的克隆表达

CONSTRUCTION OF CORYNEBACTERIUM CRENATUM GENOMIC DNA LIBRARY AND CLONING AND EXPRESSION OF ISOLEUCIN GENE IN E. COLI

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【作者】 马雪梅高东蔡勉邹文

【Author】 Ma Xuemei;Gao Deng;Cai Mian;Zou Wen(Dept.Of Microbiol.,Shandong Univ.,Jinan)

【机构】 中国协和医科大学基础医学研究所

【摘要】 以pUC19质粒为载体建立了异亮氨酸产生菌钝齿棒杆菌(Corymebacteriumcrenatum)YLl的基因文库,并通过酶切重组子、斑点杂交得到证实.共筛选5800个重组子,一个特定DNA片断在库中存在的可靠性达99.99%.从中克隆重组了带有ilvA基因片断的重组质粒pYI94,转化AHV的大肠杆菌ED8654-5,使本来不产Ile的大肠杆菌可以积累Ile1.5g/L,为进一步高效表达构建工程菌创造了条件.

【Abstract】 Using pUC19 as a vector, the genomic DNA library of the isoleucin producing strain Corynebacterium crenatum YL1 was constructed. The library has been conformed by restriction endonuclease digest and hybridization experiment and aparticular segmentpresenting in the library point to 99.99% Then the ilvA gene was cloned,and the recombinant plasmid was designated PYI94.Introduction of PYI94 into AHV’E.colt strain ED8654 can produce 1.5g/L isolecin.

【关键词】 基因文库ilv基因异亮氨酸棒杆菌
【Key words】 genomic DNA libraryilv geneisoleucinCorynebacterium
【基金】 山东大学青年科学基金
  • 【文献出处】 山东大学学报(自然科学版) ,JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) , 编辑部邮箱 ,1995年04期
  • 【分类号】Q812
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