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合成的人γ-干扰素cDNA在大肠杆菌的高效表达

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【作者】王子轩；杨迪；王启松；李伯良；吕兆海；虞建良；郑宏大；范佩芳；唐建伟；钱民章；郭海鸿；姚曼华；郑仲承；刘新垣；

【机构】中国科学院上海生物化学研究所；复旦大学遗传学研究所；中国科学院上海生物化学研究所 200031； 200433； 200031； 200031 中国科学院上海生物化学研究所进修生； 200031 中国科学院上海生物化学研究所代培研究生； 200031；

【摘要】合成了人γ-干扰素（IFN-γ）cDNA,其特点是选用了大肠杆菌偏爱密码子。将合成基因克隆到含P_L启动子的不同表达载体中,共获得9种不同的表达质粒,它们的SD与起始密码子ATG间的距离（D）不同,在起始翻译区（TIR）的最小自由生成能△G_f298^°不同,故其表达量的差异也很大。其中pLY₄-γ₅表达的IFN_γ的量占菌体总蛋白的60％—80％,为国际上所罕见。表达高的原因是由于选择（D）距离适当,△G_f298^°较高,以及选用的密码子较好。采用十分简便迅速纯化IFN-γ的方法分离包涵体可达90％以上纯度,再经一步分子筛柱层析,IFN-γ纯度即可达95％以上,比活约2.0×10⁷IU/mg。更多还原

【关键词】 γ-干扰素；人工合成基因；高效表达；

【文献出处】中国科学(B辑化学生命科学地学) ,Science in China,Ser.B , 编辑部邮箱 ,1994年10期

【分类号】TQ464
【被引频次】11
【下载频次】88

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