节点文献

质粒克隆DNA插入片段制备与标记的PCR方法

A PCR Procedure for the Preparation and Labelling of DNA Inserts Cloned in pUC Plasmid

  • 推荐 CAJ下载
  • PDF下载
  • 不支持迅雷等下载工具,请取消加速工具后下载。

【作者】 李宗东杨忠伟林云富柴建华

【Author】 Li Zongdong;Yang Zhongwei;Lin Yunfu;Chai Jianhua;Institute of Genetics,Fudan University;

【机构】 上海第二医科大学医学遗传学教研室复旦大学遗传学研究所人类基因组实验室

【摘要】 设计一对与pUC-18质粒多克隆位点两端顺序互补的引物(22bp)。用PCR扩增的方法,可以制备DNA克隆片段。如在PCR扩增时掺入α-(32)~P-dATP,可将插入片段进行同位素标记作为探针直接用于Southern印迹杂交。此法亦可用于临床基因诊断。

【Abstract】 A pair of PCR primers were selected from the sequence flanking cloning site of pUC18, and an universal PCR procedure was constructed for the preparation and radiolabelling of DNA inserts cloned in pUC plasmid. This PCR procedure facilitated the identification of insert DNA length as well as preparation of inserts. The effectiveness of radiolabelling by PCR was identified through Southern blotting of some human X chromosome specific single copy probes.

【基金】 863计划资助项目
  • 【文献出处】 高技术通讯 ,High Technology Letters , 编辑部邮箱 ,1993年11期
  • 【分类号】Q78;Q503
  • 【下载频次】13
节点文献中: 

本文链接的文献网络图示:

本文的引文网络