PCR中耐热DNA聚合酶催化DNA合成错误

【摘要】 <正> PCR（Polymerase Chain Reaction）是近年来发展起来的用于体外扩增特定DNA片段的方法,PCR早期使用的DNA聚合酶为大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的大片段（Klenow片段）,随后采用耐热DNA聚合酶（Taq DNA polymerase）,不仅使PCR操作过程大为简化,而且其催化DNA合成片段的长度、忠实性都有较大改进.但仍有极低的错误率发生.错误率发生的高低与PCR扩增条件有关.我们应用PCR技术从Ⅱ型糖尿病人（非胰岛素依赖型糖尿病）基因组DNA中扩增出胰岛素基因片段（大小为1128bp）,并将PCR产物直接克隆到M₁₃载体中(M₁₃mp18/M₁₃mp19 RFDNA),再用双脱氧链终止法作DNA序列分析更多还原