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美洲拟鲽抗冻蛋白基因在E.coli中表达的研究
The Study on Expression of Winter Flounder Antifreezing Protein Gene in E.eoli
【摘要】 本文阐述了美洲拟鲽抗冻蛋白基因在E.coli中表达的研究。用Hpa Ⅱ酶切pCT5质粒,分离出抗冻蛋白基因片段,再经Bal引酶、绿豆核酸酶处理,并连接上Bgl Ⅱ接头,插入到pORF-2表达质粒的BglⅡ位点上,筛选出正确插入方向的转化子,称pORF-AF。并对pORF-AF质粒作出部分限制性酶切图谱,测定出插入基因的DNA序列,同时用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析检测插入基因,在E.coli TK1046中的表达产物,发现在电泳图谱上有明显的融合蛋白带,分子量大于标准蛋白β-半乳糖苷酶是由大肠杆菌外膜蛋白F、抗冻蛋白和β-半乳糖苷酶组成。融合蛋白含量占总的菌体提取蛋白20%左右。
【基金】 加拿大阿尔伯塔政府资助
- 【文献出处】 遗传 ,Hereditas(Beijing) , 编辑部邮箱 ,1992年01期
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