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中国人ω1型干扰素基因的克隆、一级结构测定以及在大肠杆菌中的表达
【摘要】 采用聚合酶链反应(PCR)方法,从中国正常胎儿肝细胞染色体DNA中分离并克隆了人ω1型干扰素基因,测定了核苷酸全序列,表明原有争议的第88位密码子为GGA的核苷酸序列是正确的,因此该氨基酸为Gly。随后又利用PCR技术将所获的ω1型干扰素基因原始克隆改造成适于在大肠杆菌中表达非融合蛋白的结构形式,并以pBV220为载体在PRPL串联启动子控制下进行温控表达。表达产物的抗病毒活性达6.5×107单位/升菌液(O. D600=0.75)。IFN-ω1不仅具有很高的抗病毒活性,同时在结构上与动物滋养层蛋白高度相似,而后者又是作为母体妊娠识别信号存在于多种动物体内的抗黄体退化蛋白,因此本文获得的这—ω1型干扰素基因及重组蛋白在理论和实际上都有进一步研究的价值。
【关键词】 干扰素;
基因表达;
聚合酶链反应(PCR);
滋养层蛋白;
【基金】 国家“863”高科技研究与发展计划生物技术领域基金
- 【文献出处】 中国科学(B辑 化学 生命科学 地学) ,Science in China,Ser.B , 编辑部邮箱 ,1992年10期
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