家兔核移植中卵母细胞质受体的研究

【摘要】 本文采用DAPI荧光染色和电刺激孤雌活化(电激活)两种方法,对家兔核移植过程中卵母细胞的去核和激活进行研究。根据DAPI荧光染色结果,将卵母细胞的第一极体与中期染色体的相对位置的符合程度分为三类:中期染色体在第一极体下面(Ⅰ类)、中期染色体在第一极体邻近(Ⅱ类)、中期染色体与第一极体相距较远(Ⅲ类),不同成熟时间收集的卵母细胞在同一个体以及个体间,其第一极体与中期染色体的相对位置的符合程度(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类所占比例)不同;随时间的推移,Ⅱ、Ⅲ类逐渐增加。家兔卵母细胞经电激活后体外培养结果表明:体内成熟或体外培养到17—19小时收集的卵母细胞,电激活效果最佳。因此,根据核移植全过程中的去核、移核和供核细胞与受体细胞质恢复培养等综合因素,我们认为家兔细胞核移植,选用注射排卵激素(LH或HCG)后13—15小时从输卵管中收集的卵母细胞,在体外显微操作和培养2—4小时,再进行电融合和激活,其卵母细胞的去核率、重构胚的融合率和激活率都最高。更多还原