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布氏杆菌M28株染色体基因库的建立

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【作者】 刘兴汉

【机构】 中国农科院哈尔滨兽医研究所

【摘要】 分别以PBR328和λgt11为载体建立了布氏杆菌强毒M28株染色体基因库。用超声波切割染色体 DNA,EcoRV酶切 PBR328,经平端连接重组、转化 RRI,转化率为2.5×10~1/ml,重组率为30%,得重组子1500余个.用 EccRI 人工接头将超声波切割的染色体 DNA 片段与λgt11连接重组,转染 y1090,转染率为2×10~5PEU/ml,重组率为15.9%,得重组噬菌体16000余个。布氏杆菌染色体基因库需要重组克隆为1470~2950个.

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