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水稻叶绿体DNA的分离纯化及其限制酶切分析

Isolation and Restriction Endonuclease Analysis of Rice Chloroplast DNA

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【作者】 赵衍翁醒华胡华萃明镇寰费承伟沈桂芳唐愫汪训明柴建华

【Author】 Zhao Yan Weng Xinghua Hu Huacui Ming ZhenhuanFei Chenwei Shen Guifang Tang Su ( Department of Biology, Hangzhou University )Wang Xunming Chai Jianhua ( Inst. of Genetics, Fudan Univ. )

【机构】 杭大生物学系复旦大学遗传学研究所复旦大学遗传学研究所

【摘要】 通过在匀浆缓冲浪中添加抗坏血酸并结合蔗糖密度梯度离心和差速离心法等分离纯化了水稻叶绿体 DNA(ctDNA),得率高达100μg/100g叶,其纯度足以用于限制酶分析和分子生物学研究.环状水稻ctDNA总长度为129.5Kbp,PvuⅡ、SalⅠ、PstⅡ、Hind Ⅲ、EcoRⅠ和BamHⅠ在ctDNA上的切点分别为11、12、17、37、67和44.

【Abstract】 By homogenizing rice leaves in a buffer solution containing ascorbic acid and by centrifugalizing the suspension repeatedly the intact chloroplast was isolated, and the chloroplast DNA was finally obtained. The ctDNA is in high yield ( about 100 μg DNA/100 g leaves ) and pure enough for restriction endonuclease analysis and other purpose of molecular biology research.The total length of the circular rice ctDNA is 129. 5Kbp. On the ct-DNA, PvuⅡ. SalⅠ. Pst Ⅰ. Hind Ⅲ. EcoR Ⅰ and BamH Ⅰ has 11, 12, 17, 37, 67, and 44 cleavage sites respectively.

【关键词】 水稻叶绿体DNA抗坏血酸限制酶带型
【Key words】 ricechloroplast DNAascorbic acidrestriction pattern
【基金】 国家自然科学基金
  • 【文献出处】 杭州大学学报(自然科学版) ,JOURNAL OF HANGZHOU UNIVERSITY(NATURE SCIENCE) , 编辑部邮箱 ,1991年03期
  • 【被引频次】4
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