免疫小鼠制备植物病毒腹水抗体的研究和应用

【摘要】 南方菜豆花叶病毒（SBMV）、烟草花叶病毒（TMV）经 PEG 沉淀、差速离心、梯度离心纯化后,以每只鼠0.1、0.5、1 0、1.5、2mg 剂量,每周一次,共三次分别免疫小鼠,末次免疫后8天注射鼠腹水癌细胞(S₁₈₀),8～13天后鼠腹部膨大,抽取腹水,离心,取上清液,即为特异腹水抗体。实验证明:每只小鼠免疫0.1mg 抗原,获得抗体滴度1:200万（ELISA）;免疫1.5mg,可获得最高滴度1:3200万的特异抗体。同时,还研制了大豆花叶病在毒（SMV）、马铃薯×病毒（PVX）,马铃薯 Y 病毒（PVY）,蚕豆萎蔫病毒（BBWV）、花生矮花病毒（PSV）、芜菁花叶病毒（T_uMV）腹水抗体,滴度为1:400万～3200万。一般一只小鼠可以获得20～40ml,最多66ml 腹水抗体,其抗体性质与同种抗原免疫兔、鼠制备的抗血清相同。这是用微量抗原制备多量特异抗体的好方法。用鼠腹水抗体与兔抗血清组合异种动物抗体双夹心酶联试验,可得到与经典的双抗体夹心法相当或略好的检测效果,又不需自制特异抗体酶标记物,适用于检测大量样品,为植物检疫提供一个好的检验手段。更多还原