势障层析(PBC)——一种新的分离蛋白质的层析方法

【摘要】 <正> 目前应用较广且比较被人熟悉的层析方法有离子交换层析,凝胶层析,亲和层析和疏水层析,其中以离子交换层析使用得最广泛,而且历史也较长。各种层析方法都有其自身的特点,在此不必赘述。但当它们用于分离蛋白质时,其分离效果都是仅由蛋白质的某单一物理化学特性来决定的。近年来由纽约州立大学 Ruchenstein 等人建立了一种新的层析方法,称为势障层析(Potential Barrier Chromatography,简写为 PBC)。这种层析方法对蛋白质的分离效果是由蛋白质的多种理化性质(如蛋白质的带电量,分子形状、大小以及疏水性等)的综合效应来决定的,因此这种方法的建立大大地丰富了传统的层析方法。PBC 是依据胶体稳定性理论建立起来的。在溶液中,胶体颗粒之间的相互作用主要由两方面的作用力来决定,即范德华引力(Van der Waals attraction)和静电斥力(electrostatic repulsion)。由于胶体颗粒表面的水化膜及双电层受溶液的 pH,离子强度,疏水性影响比较大,因此也影响着胶粒之间的相互作用。更多还原