分泌抗A群脑膜炎球菌多糖单克隆抗体的杂交瘤细胞系的建立

【摘要】 用A群脑膜炎球菌悬液免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞,经50％PEG处理进行融合。采用微量被动血凝试验（PHA）筛选及有限稀释法克隆化后,获得4株分泌抗A群脑膜炎球菌多糖单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞系(WSA—C₁₁,WSA—E₆,WSA—D₄,WSA—F₈),培养上清和诱生的小鼠腹水的特异性抗体的PHA和ELISA滴度分别为1.28—5.12×10^-2和1×10^-5—10^-6、4株McAb和PHA滴度均被A群脑膜炎球菌多糖抗原抑制,其血凝抑制滴度与所加抑制抗原的量成线性关系,4株McAb均与3株A群脑膜炎球菌菌株呈现强的玻片凝集反应,3株B群,2株C群,1株D群,及7株新群脑膜炎球菌菌株不发生效义玻片凝集反应。试验证明4株杂交瘤细胞所分泌的抗体是针对具有群特异性的A群脑膜炎球菌多糖抗原的。4株McAb具有很高的亲和力,经80～160倍稀释与A群脑膜炎球菌菌株仍呈现强的玻片凝集反应,而A群脑膜炎球菌诊断血清（Pc-Ab）高于10倍稀与本菌的玻片凝集反应明显减弱,McAc的细菌试管定量凝集反应滴度也较PcAb诊断血清高16～32倍。4株McAb均属小鼠IgM类。杂交瘤细胞系染色体计数为91～95条。4株条交瘤细胞在体外连续培养4个多月,40余代,经液氮冻存复苏后仍保持稳定的分泌抗体的能力。更多还原