小鼠肝匀浆细胞色素P-450含量测定方法的探讨

【摘要】 <正> 细胞色素P-450是单加氧酶系的重要组成部分,还原状态下可与一氧化碳结合,在450nm处有明显的吸收峰,据此可对其进行定性和定量测量。肝细胞细胞色素P-450含量测定广泛用于药理学、毒理学和环境医学等研究领域。文献上的方法多须使用超速离心、光谱扫描等仪器设备,使其应用受到一定限制。本文介绍用国产751G型分光光度计测定小鼠肝匀浆细胞色素P-450含量的简便方法。一、样品制备和测量取小鼠肝脏,拈去血液,称重。用0.25M蔗糖Tris-HCl缓冲液制成匀浆,浓度为200mg/ml。纱布过滤后,用含150mMKCl、10mM MgCl₂的50mM Tris-HCl缓冲液稀释至20mg/ml。通以一氧化碳5分钟更多还原