酵母丙氨酸转移核糖核酸5′-半分子(1—35)的合成

【摘要】 本文报道了应用T₄RNA连接酶将酵母丙氨酸转移核糖核酸(tRNA_y^Ala)5′-半分子中的三个寡核苷酸片段[—13（Ⅰ）;14—22（Ⅱ）;23—35（Ⅲ）]连接成5′-半分子的工作。由于寡核苦酸片段的纯度高,多核苷酸激酶和T₄RNA连接酶的质量好,采用连续反应的方法,简化了分离步骤,使产物的得率大大提高,二十二核苷酸的连接率是75％,三十五核苦酸的连接率是90％,以第一步反应原料为基数计算,最终产物的总得率是21％。经连接点和末端核苷酸分析,证明它的结构是正确的。将合成的5′-半分子与天然的3′-半分子在T₄RNA连接酶的催化下连接成人工半合成的完整tRNA_y^Ala,具有接受[³H]-丙氨酸和将[³H]-丙氨酸转移到蛋白质中的生物活力。更多还原