小鼠肝匀浆细胞色素P-450含量测定

【摘要】 <正> 肝细胞细胞色素P-450含量测定广泛用于药理学、毒理学和环境医学等研究领域。文献上的方法多须使用超速离心、光谱扫描等仪器,使其应用受到一定限制。本文介绍用国产751G型分光光度计测定小鼠肝匀浆细胞色素P-450含量的简便方法。一、样品制备:取小鼠肝脏,拈去血液。用0.25M蔗糖Tris-HCl缓冲液制成匀浆,浓度为200mg/ml。滤过后用含150mM KCl、10mM MgCl₂的50mmTris-HCl缓冲液稀释至20mg/ml。通以一氧化碳后,将样品等量移入样品杯和参照杯,静置3分钟,再向样品杯加入连二亚硫酸钠、混匀,静置2分钟后用751G型分光光度计进行测量,取波长分别为450nm和490nm时的吸收度,依公式计算细胞色素P-450含量。二、一氧化碳的制备和通气时间的选择:一氧化碳可用甲酸脱水制取。通气（100个气泡/分）1～8分钟,细胞色素P-450的测定值维挣在同一水平。在更多还原