【作者】 李招发；

【导师】 李青山； 付学奇；

【作者基本信息】 吉林大学 ， 生物化学与分子生物学， 2005， 博士

【摘要】 蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTPs)是细胞信号传导中最重要的酶之一,它们和人的病理生理现象密切相关。最近研究表明,蛋白质酪氨酸磷酸酶PRL-3(肝再生磷酸酶-3)与结肠癌的转移密切相关,PRL-3、PRL-1 和PRL-2能促进细胞的生长、分化和癌变。本论文在研究PRL-3 的同时,也研究PRL-2 和PRL-1。本研究表达和纯化了PRLs,PRLs 包括PRL-1、PRL-2、PRL-3 和CePRL(CePRL 是线虫体内唯一的PRL 蛋白酪氨酸磷酸酶)。用pNPP 作为底物,对PRLs 进行了酶学表征。研究表明:PRLs 具有米氏酶特征,离子强度、金属离子和PTPs(蛋白酪氨酸磷酸酶)抑制剂对PRLs 的影响与其它PTPs 相同。PRLs 的最适pH 值为7.7,而其它PTPs 最适pH 值为5.0。利用Westen blotting技术分析了结肠癌细胞SW480和SW620中PRLs的表达,并利用免疫组化技术分析正常结肠组织、结肠癌原位组织和淋巴节转移中PRL-3 的表达与定位。利用基因操作技术对PRLs 基因进行C104S 失活突变,转染结肠癌细胞SW480 和SW620。研究了PRLs 对SW480 和SW620 细胞扩散、粘附和增殖的影响。实验表明:PRLs 具有促进SW480 和SW620 细胞的扩散、粘附和增殖的作用。最后研究了大蒜提取液对SW480 和SW620 细胞粘附、扩散和增殖的影响。实验证明:大蒜提取液能抑制SW480 和SW620 结肠癌细胞的扩散和增殖,为进一步研究大蒜防癌和抗癌的机理提供了理论依据。更多还原