| 【项目成果摘要】 |
本项目建立、验证并确定了可靠的破骨细胞体外培养、纯化方法,并对人滞留乳牙破骨细胞进行了成功的分离与提取,为研究生理状态下的破骨细胞探索了新的途径。设计制作了一套能用于破骨细胞的性能良好的流体剪切力加载装置。在此基础上,对流体剪切力作用下破骨细胞形态、超微结构、及其信号转导的变化进行系统研究,首次确定了破骨细胞ATP6Vla1、TcIRG1 mRNA表达的时间效应规律,以及动物年龄对破骨细胞培养效果的影响。发现流体剪切力作用下破骨细胞形态呈波动性变化,F-actin环破坏、空泡面积和移动性增加。破骨细胞增殖和分化受到抑制,抑制作用与cAMP-PKA信号通路有关;降钙素受体、空泡型质子泵mRNA表达上调,RANKL、整合素、Ca Ⅱ、Cat K mRNA表达下调,流体剪切力通过改变其胞内关键信号因子的转录水平而影响骨吸收。; |