| 【项目目标】 |
【研究目标】
建立和完善高通量研究蛋白互动网络以及干细胞向生殖细胞分化的技术平台，包括蛋白质组学平台，BiFC组学平台, 基因组学平台，生物信息学平台。在此基础上，发现若干新的调控干细胞向生殖细胞分化的关键转录因子和染色质修饰因子，在整体细胞水平上初步确立干细胞向生殖细胞分化的网络系统。
【研究主要内容】
1.以一些PGC表达的关键调控元，如Nanog, Oct4，RAR/RXR, Smad为研究对象, 运用蛋白质组学及BiFC组学平台, 系统地发现直接与关键调控元相互作用的蛋白, 并依此建立以PGC关键调控元为中心的信号调控网络。
2.以Blimp1、Stella,PITX2,c-kit、Stra-8,vasa和DAZL等重要的PGC表达基因为模式，从PGC或生殖母细胞调控元及与其相互作用的蛋白质组中筛选出控制这些基因表达的关键因子。从表观遗传学着手，研究PGC诱导过程中组蛋白修饰的动态过程和不同修饰与PGC或精子发育之间的相互关系，以全面了解转录因子和组蛋白修饰（着重于组蛋白酰基化、甲基化的研究）在PGC形成中的功能与调控机制。
3.利用四环素调节表达系统, RNAi, ChIP等技术阐述端粒蛋白以及端粒酶在干细胞向PGC诱导过程中的作用与机理。
4.探讨在诱导牛干细胞向生殖细胞分化过程中，以上信号调控网络的适用性。 |